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  技术文章  
 

蜂胶软胶囊中总黄酮测定方法


发布日期:[2024/5/21 9:08:13] 共阅[3836]次
         蜂胶是由蜜蜂,特别是工蜂,从植物的树胶、树脂中采集,并与上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成 的具有黏性的固体胶状物。现代研究结果表明,蜂胶含有维生素、酚类、蓓烯类、黄酮类化合物等多种营养保健成分。在蜂胶的众多活性物质中,黄酮类物质是为关键的成分,它具有抗菌、杀毒、 消炎止痛、降血脂、促进机体组织再生和增强机体免疫能力等功效。近年来,蜂胶产品在市场上受到了广泛的关注和认渴,其种类也日益丰富,主要以胶囊形式呈现。蜂 胶中主要活性成分为黄酮类化合物,已成为研究热点,且市售的蜂胶胶囊类产品均以总黄酮含量作为评价指标。黄酮类化合物的测定有多种方法,如液相色谱法﹑分光光度法等,液相色谱法可以测定单一的黄酮成分,分光光度比色法可以测定黄酮成分的总量。 紫外分光光度法被广泛应用于测定蜂胶制品中的总黄酮含量,因为它具有操作简便、准确度高且易于实施的特点,因此深受广大研究者的青睐。

实验方法:根据《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》(GB/T 20574—2006),利用分光光度比色法对蜂胶软胶囊中的总黄酮进行定量分析。

试剂

芦丁标准品(含量95.5%,上海安谱璀世标准技术服务有限公司,批号 2251131);

无水乙醇、硝酸铝、95% 乙醇、醋酸钾(分析纯,南京化学试剂有限公司)

仪器

UV-1800 紫外可见分光光度计(上海美析仪器有限公司);

超声波清洗仪;

高速台式离心机;

BT25S 十万分电 子天平、BSA224S-CW 电子天平。

试样的制备

称取蜂胶软胶囊内容物0.5 g精却1 mg)于烧杯中,加入95%乙醇约30 mL,室温下超声提取20 min,将溶液转移至50mL的容量瓶中,加入95%乙醇至刻度线,混合均匀后进行过滤,弃去初滤液, 收集滤液待测。准确吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中,分别加入1.0 mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,加95%乙醇至刻度,摇匀,静置10 min3 000 r·min-1离心3min,取上清液待测。空白实验精密吸取1.0 mL待测溶液于50 mL容量瓶中,加95%乙醇至刻度,摇匀。用1 cm比色皿,在415 nm以空白试液作参比,测定样品吸光度。

标准溶液制备

称取10.50mg芦丁标准品(含量95.5%)于50 mL容量瓶中,用无水乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀, 溶液浓度为0.2 g·L-1 。吸取标准溶液0mL1.00 mL 2.00 mL3.00 mL4.00 mL5.00 mL6.00 mL(相当于芦丁含量 0 mg0.2 mg0.4 mg0.6 mg0.8 mg

1.0 mg 1.2 mg),分别置于50 mL容量瓶中,向容量瓶中加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,用95%乙醇定容至刻度,摇匀,静置10 min后测定。

结果计算

总黄酮计算公式为

式中:X 为黄酮类化合物的总含量,%

m1 由标准曲线上查出测定液中芦丁质量,mg

m 为样品的质量,g

d 为稀释比例。

 

原创作者:上海美析仪器有限公司

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