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V-1200分光光度计的原理


发布日期:[2015/7/17 15:06:33] 共阅[6617]次
分光光度计的原理
分光光度计的简单原理如下:
分光光度计是采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过待测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计要测量的样品必须是均匀的溶液,不能有沉淀,如果有沉淀的话就必须要求摇匀。下面就如何测量进行浅述:

分光光度计是利用分光光度法对物质进行定量、定性分析的仪器

分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。
常用的波长范围为:
(1)、200~400nm的紫外光区。
(2)、400~760nm的可见光区。
(3)、2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式: 1 A=log — =ECL T 式中 A 为吸收度; T 为透光率; E 为吸收系数,采用的表示方法是(E1% 1cm),即吸收度换算成溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm的数值; C 为100ml溶液中所含被测物质的重量,g(按干燥品或无水物计算); L 为液层厚度 ,cm。 物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量,应用的领域也日渐广泛。
分光光度计,紫外分光光度计,紫外可见分光光度计

 

原创作者:上海美析仪器有限公司

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